Kotomine Kirei ist der Sohn von Risei Kotomine, einem Priester, der während des fünften Heiligen Gralskriegs die Kathedrale leitet. Er fungiert als Aufseher des Heiligen Gralskriegs und als Agent der Kirche. Ausgebildet in der Acht Extremitäten Faust, besitzt er außergewöhnliche Kampfkraft, die nur von wenigen Meistern wie Kayneth im vierten Krieg übertroffen wird. Überraschenderweise nutzt er Heilmagie, die er gelernt hat, um sich um seine Frau zu kümmern, obwohl sie schmerzhaft angewendet wird. Trotz eines tragischen Lebens wählt Kirei das Böse, angestiftet, aber nicht gezwungen von Archer in Fate/Zero. Er hat ein klares moralisches Empfinden, verkörpert jedoch von Natur aus das pure Böse, einzigartig unter den Menschen in der Fate-Serie, und strebt ständig danach, Antworten auf seine verdrehten Wünsche durch böse Taten zu finden.